No ssRNS bakteriofāgiem atvasināto vīrusveidīgo daļiņu platformas pielietojums Laimas slimības vakcīnas prototipa izstrādē

Abstract

ssRNS bakteriofāgu apvalka proteīnu veidotās vīrusveidīgās daļiņas tiek veiksmīgi izmantotas vakcīnu dizainā savu imunogēno īpašību un spējas prezentēt patogēnu epitopus. Bakalaura darbā tika pētīta trīs jaunu ssRNS bakteriofāgu apvalka proteīnu kovalento dimēru spēja pašsavākties imunogēnās himērās VLP. Jau iepriekš izveidoto apvalka proteīnu kovalento dimēru sekvenču N- vai C- galam ģenētiski pievienoja Laimas slimības izraisītājas Borrelia burgdorferi proteīna BB0689 sekvenci. Iegūtajiem sešiem konstruktiem tika pārbaudīta himērā proteīna producēšanās un šķīdība. Šķīstošus proteīnus attīrīja ar gelfiltrāciju. VLP izveidošanos pārbaudīja elektronu mikroskopā. Iegūtās VLP, kur antigēns pievienots proteīna C- galam, imunogenitāte un baktericiditāte tika pārbaudītas peļu modelī.

Virus-like particles formed by ssRNA bacteriophage coat proteins are successfully used in vaccine design due to their immunogenic features and ability to present foreign epitopes. The ability of three new ssRNA bacteriophage coat protein covalent dimers to self-assemble into immunogenic chimeric VLPs was investigated in this research. BB0689 protein sequence of Borrelia burgdorferi, causative agent of Lyme disease, was genetically added to N- or C-terminus of generated covalent dimer sequence of the coat protein. Chimeric protein production and solubility of six obtained constructs were tested and soluble proteins purified by gel filtration. Then using an electron microscope examined formation of VLPs. The immunogenicity and bactericidal activity of the resulting VLP, where antigen was added to the C-terminus, was tested in a mouse model.