Vakcīnas prototipa pret Alcheimera slimību izstrāde pielietojot no ssRNS bakteriofāga AP205 atvasināto vīrusveidīgo daļiņu platformu

Abstract

Alcheimera slimība ir globāla problēma pret kuru nav izstrādātas efektīvas uz Aβ plāksnēm vai nešķīstošajiem tau proteīniem mērķētas terapijas. Maģistra darba ietvaros terapeitiskās vakcīnas izstrādei tika izmantota droša un pārbaudīta platforma – ssRNS bakteriofāga AP205 vīrusveidīgās daļiņas (VLP), kuras spēj uz savas virsmas prezentēt svešu antigēnu epitopus. Par antigēniem tika izmantoti piroglutaminilēti Aβ peptīda epitops 3-8 un tau peptīda epitops IKHVPGGGS, kurus ģenētiski sapludināja AP205 apvalka proteīna sekvences N- un/vai C-terminālajiem galiem. Himērie proteīni veiksmīgi producējās, bija šķīstoši, veidoja VLP, ka arī tika attīrīti ar vairākām hromatogrāfijas metodēm. VLP veidošanās tika pierādīta elektronmikroskopā. Vakcīnas kandidāts ar Aβ peptīda epitopu 3-8 veiksmīgi piroglutaminilējās, ka arī bija imunogēns peļu modelī.

Alzheimer's disease is a global problem for which no effective therapies targeting Aβ plaques or insoluble tau proteins have been developed. As part of the master thesis, safe and proven platform was used for the development of therapeutic vaccine - ssRNA bacteriophage AP205 virus-like particles (VLPs), which are able to present foreign antigens epitopes on the surface. Pyroglutaminylated Aβ peptide epitopes 3-8 and tau peptide epitopes IKHVPGGGS genetically fused to the N- and/or C-terminal ends of AP205 coat protein sequences were used as antigens. The chimeric proteins were successfully produced, soluble, formed VLPs, and were purified by multiple chromatographic methods. VLP formation was demonstrated by electron microscopy. A vaccine candidate with Aβ peptide epitope 3-8 was successfully pyroglutaminylated, which was also immunogenic in mice model.