• English
    • Latviešu
    • Deutsch
    • русский
  • Help
  • русский 
    • English
    • Latviešu
    • Deutsch
    • русский
  • Войти
Просмотр элемента 
  •   Главная
  • B4 – LU fakultātes / Faculties of the UL
  • B --- Bij. Bioloģijas fakultātes studentu noslēguma darbi / Faculty of Biology - Graduate works
  • Bakalaura un maģistra darbi (BF) / Bachelor's and Master's theses
  • Просмотр элемента
  •   Главная
  • B4 – LU fakultātes / Faculties of the UL
  • B --- Bij. Bioloģijas fakultātes studentu noslēguma darbi / Faculty of Biology - Graduate works
  • Bakalaura un maģistra darbi (BF) / Bachelor's and Master's theses
  • Просмотр элемента
JavaScript is disabled for your browser. Some features of this site may not work without it.

Hepatīta B core mutantu konstruēšana, ekspresija un attīrīšana strukturāliem pētījumiem un jaunu vakcīnu prototipu izstrādei

Thumbnail
Открыть
301-43047-Gribonika_Inta_ig11091.pdf (1.953Mb)
Автор
Gribonika, Inta
Co-author
Latvijas Universitāte. Bioloģijas fakultāte
Advisor
Voronkova, Tatjana
Дата
2014
Metadata
Показать полную информацию
Аннотации
Darba mērķis bija konstruēt un attīrīt dažādus hepatīta B vīrusa (HBV) nukleokapsīda proteīna (HBc) mutantus (a) strukturāliem pētījumiem un (b) jaunu vakcīnu prototipu izstrādei. HBc dimēru mijiedarbības pētījumiem ar šūnas transportproteīniem un/vai kodola poru kompleksa proteīniem uz 145 aminoskābju garā HBc (HBcΔ145) bāzes tika konstruēti mutanti: N33→R, A36→Q un R127→E. Divi pēdējie tika veiksmīgi ekspresēti un attīrīti. Abi veidoja dimērus, bet ne nukleokapsīdas, tomēr A36→Q proteīns producējās labāk un tika iegūts ar augstāku tīrības pakāpi. Jaunu vakcīnu prototipu izstrādei tika pārbaudīta HBc mutanta E77→K spēja ķīmiski saistīt Laima boreliozes izraisītājas Borrelia burgdorferi ārējās virsmas proteīnu BB0689. Tika konstruēts E77→K mutants uz 176 aminoskābju gara HBc bāzes. Izveidotais konstrukts tika ekspresēts E. coli un nukleokapsīdu formā attīrīts no šūnām. Šī struktūra bija piemērota BB0689 proteīna ķīmiskai piesaistei, un ar himērajām daļiņām tika imunizētas peles.
 
The main purpose of this work was to generate hepatitis B core mutants for (a) structural investigations and (b) generation of novel vaccine prototypes. Three HBc mutants were constructed on basis of C-terminally truncated 145 amino acids long HBc (HBcΔ145) to investigate possible interactions between HBc dimers and cellular transportproteins. Mutants were created by substitutions of N33→R, A36→Q and R127→E. Last two were expressed and purified. Both were forming free dimers but only protein A36→Q was suitable for further investigations in HBV cellular transport due to its high purity. As for novel vaccine candidates, HBc capsid-forming mutant E77→K was tested for chemical coupling to Lyme disease agent Borrelia burgdorferi outer surface protein BB0689. Mutation was constructed on basis of 176 amino acids long HBc. Construct was expressed following purification of VLPs. Capsids were suitable for chemical coupling to BB0689, and resulting chimeric VLPs were used for the immunization.
 
URI
https://dspace.lu.lv/dspace/handle/7/18954
Collections
  • Bakalaura un maģistra darbi (BF) / Bachelor's and Master's theses [1229]

University of Latvia
Контакты | Отправить отзыв
Theme by 
@mire NV
 

 

Просмотр

Весь DSpaceСообщества и коллекцииДата публикацииАвторыНазванияТематикаЭта коллекцияДата публикацииАвторыНазванияТематика

Моя учетная запись

Войти

Статистика

Просмотр статистики использования

University of Latvia
Контакты | Отправить отзыв
Theme by 
@mire NV