Cilvēka ādas cilmes šūnu neirodiferenciācija in vitro

Abstract

Ādas cilmes šūnu neirodiferenciācija un izmantošana terapeitiskos nolūkos, ir ievērojams diskusiju un izpētes objekts. Šī darba mērķis bija gūt labāku ieskatu šūnu neirodiferenciācijas procesos, iegūt iemaņas darbā ar audu kultūru laboratorijā un apskatīt pieejamo literatūru par cilmes šūnām un par iespējām tās izmantot terapeitiskos nolūkos. Darbā izmantojām sekojošās metodes: dermā esošo cilmes šūnu izdalīšana, šūnu pavairošana un uzglabāšanas metodes, neirodiferenciācijas inducēšanas, imunocitoķīmiskā krāsošana (ICĶ), plūsmas citometrija. ICĶ iegūtie dati liecina, ka no dermas iegūtās šūnas ekspresē nestīnu, diferencējot šūnas FEB un samazinātā seruma vidē tās ekspresē nestīnu, tubulīnu B III un GFAP virsmas marķierus. Plūsmas citometrijas dati liecina, ka diferenciācijas laikā šūnās pastiprinās Mitotracker CMX ROS fluorescences intensitāte, kas varētu liecināt, par paaugstinātu mitohondriju membrānas potenciālu.

Neural differentiation of skin stem cells and their use for therapeutic purposes, is a significant discussion and research subject. This work aims were to gain a better insight into the neural differentiation, skills for the work with tissue culture in laboratory and to review available literature on stem cells and possibilities of their use for therapeutic purposes. Several methods were employed including: isolation of dermal stem cells, cell cultivation and storage techniques, as well as neural differentiation induction, imunocytochemistry (ICC) and flow cytometry. ICC results indicate that dermal stem cells express nestin, while after differentiation in low serum or FEB media cells express nestin, tubulin B III and GFAP surface markers. Flow cytometry data suggests that induction of differentiation correlates with increased Mitotracker CMX ROS fluorescence intensity that could mean increased mitochondrial membrane potential.