Fibrīna matriksa izmantošana 3D dermas šūnu kultivēšanā

Abstract

Darba mērķis bija izveidot 3D dermas šūnu kultivēšanas modeli polimerizējot plazmā esošo fibronektīnu, kā katalizatorus izmantojot CaCl2 un traneksāmskābi, un relatīvi novērtēt gēnu ekspresijas un augšanas faktoru sekrēcijas izmaiņas šūnu kultivēšanas gaitā. Veidojot fibrīna matriksu tika pārbaudītas 1% un 1.5% CaCl2 un 5mg, 7mg un 10mg traneksāmskābes koncentrācijas. Šūnu kultivēšanai tika izmantotas divas dermas šūnu līnijas. Labākas matriksa īpašības uzrādīja paraugi ar augstāku CaCl 2 un traneksāmskābes koncentrāciju. Tika novērotas atšķirības starp šūnu līnijām gan augšanas faktoru un kolagēna gēna ekspresijas līmenī, gan augšanas faktoru sekrēcijas līmenī. Salīdzinot ar šūnu kultivēšanu monoslānī uz virsmas, tika konstatētas izmaiņas fibroblastu augšanas faktoru gēnu ekspresijā, bet netika novērota strukturālo proteīnu sintēze. Atslēgas vārdi: 3D dermas šūnu kultūras, ādas audu inženierija, gēnu ekspresija, FGF.

The aim of this study was to construct a model for 3D dermal cell cultivation by polymerizing human plasma using CaCl2 and tranexamic acid as catalyst, and evaluate elative changes of gene expression and growth factor secretion. To create 3D fibrin matrix following concentrations of catalysts were used: CaCl 2 -1% and 1.5%, tranexamic acid- 5mg, 7mg and 10mg. Two dermal cell lines were used for cultivation.Samples with higher catalyst concentrations showed better matrix properties. Differences between cell lines in gene expression and growth factor secretion were detected. When compared with cells cultivated in monolayer, changes in growth factor synthesis were observed, though there was lack of structural protein synthesis. Key words: 3D dermal cultures, skin tissue engineering, gene expression, FGF.