Alfavīrusu vektoru transdukcijas efektivitātes paaugstināšana ar magnētiskām nanodaļiņām vēža šūnās

Abstract

Pēdējā laikā alfavīrusu vektoru pielietojums pretvēža terapijā eksperimentālos modeļos kļūst arvien izplatītāks. Semliki meža vīruss (SFV) ir potenciāls vēža gēnu terapijas vektors, kas spēj nodrošināt relatīvi īslaicīgu, bet augsta līmeņa heterologu proteīnu ekspresiju vēža šūnās. Transdukcijas efektivitātei ir liela nozīme optimālai gēnu piegādei audzējos. Ir pierādīts, ka magnētiskās nanodaļiņas (MNPs) palielina šūnu transdukciju ar dažādiem vīrusu vektoriem in vitro. Šajā darbā tika pētīts MNPs panelis, lai uzlabotu vēža šūnu transdukciju ar SFV vektoru. Tika pielietota magnetotransdukcija, izmantojot pozitīvi lādētas MNPs, kas palielina Semliki meža vīrusa transdukciju TS/A, B16, 4T1, un Huh-7 šūnu līnijās in vitro fetālā seruma klātbūtnē. Pozitīvi lādētās MNPs efektīvi uzņēma SFV daļiņas, neatkarīgi no izmantotās barotnes, un MNPs-SFV kompleksi tika veiksmīgi atdalīti no suspensijas ar magnētisko izgulsnēšanu. Iegūtie rezultāti atklāja MNPs iespējamo pielietojumu uzlabotai SFV vektoru piegādei.

Recently, the use of alpha virus vectors in anti-cancer therapy in vivo is becoming increasingly popular. Semliki Forest virus (SFV) is a potential cancer gene therapy providing relatively short-term but high-level heterologous protein expression in cancer cells. Transduction efficiency plays an important role in optimal gene delivery in tumors. Magnetic nanoparticles (MNPs) have been shown to increase cell transduction in a number of viral vectors in vitro. In this work, several types of MNPs were studied to improve cancer cell transduction with SFV vector. Magnetotransduction was applied using positively charged MNPs which increase Semliki forest virus transduction of TS/A, B16, 4T1, and Huh-7 cells in vitro in the presence of fetal serum. Positively charged MNPs effectively absorbed SFV particles, regardless of the medium used, and MNPs-SFV complexes were successfully isolated from suspension by magnetic precipitation. These results revealed the potential use of MNPs for improved delivery of SFV vectors.