Alfavīrusu vadīta SI-CLP gēna piegāde peļu krūts vēža modelī

Abstract

Pēdējā laikā parādīta augsta alfavīrusu vektoru aktivitāte divos pretvēžu terapijas pamatvirzienos: audzēju šūnu apoptozes indukcijā un pretvēža imūnmodulācijā, kur makrofāgiem ir neaizvietojama loma pretvēža imūnatbildes veidošanā. Šī darba ietvaros izveidots jauns onkolītisks SFV vektors ar saturošo hitināzei-līdzīgo peles SI-CLP gēnu, kura funkcijas organismā līdz šim nav zināmas. Izveidotā rekSFV1/Enh.mSI-CLP vektora raksturošanai tika analizēta tā infekcijas spēja BHK-21 un peļu krūts vēža TS/A šūnu līnijās in vitro un SI-CLP proteīna produkcijas un sekrēcijas pārbaude ar Western blot metodi. Lai izpētītu vektora terapeitiskas īpašības, tika veikts in vivo eksperiments krūts audzēja TS/A modelī. Atkārtotas intratumorālas injekcijas ar SFV vektoru uzrādīja audzēja samazināšanos visām ārstētām pelēm par 10–40% un tika detektēta SI-CLP proteīna spēja stimulēt makrofāgu plūsmu uz audzēju perifēriju, kas pierāda tā terapeitisko potenciālu vēža terapijā.

Lately high activity of alphavirus vectors has been shown in two main directions of anti-cancer therapy: induction of tumor cell apoptosis and anticancer immunomodulation, where macrophages take irreplaceable role in anti-tumor immune response. In this study, we have designed a new oncolytic SFV vector carrying chitinase-like mouse SI-CLP gene, that functions still remain unknown. The infection ability of constructed rekSFV1/Enh.mSI-CLP vector was analyzed in vitro using BHK-21 and mouse breast cancer TS/A cell lines, and SI-CLP protein production and secretion was tested by Western blot technique. To study vector therapeutic potential, in vivo experiment in TS/A mammary tumor models was performed. We have shown that repeated intratumoral injections with SFV vector led to 10–40% reduction in tumor volume in all treated mice, moreover, SI-CLP protein was able to stimulate macrophage infiltration in tumor periphery that demonstrates its high therapeutic potential for cancer treatment.