Barības vielu atkarīgo signālceļu nozīme fenotipiskās atbildes veidošanā adenīna badināšanas laikā maizes rauga šūnās
Autor
Ozoliņa, Zane
Co-author
Latvijas Universitāte. Bioloģijas fakultāte
Advisor
Liepiņš, Jānis
Datum
2017Metadata
Zur LanganzeigeZusammenfassung
Šī darba ietvaros noskaidrota TOR un PKA raksturīgo mērķproteīnu - transkripcijas faktoru Gln3p, Msn2p, Msn4p un proteīnkināzes Rim15 iespējamā saistība ar auksotrofās adenīna badināšanas izraisītā paaugstinātā stresa izturības fenotipa veidošanos maizes raugā. Veikta izvēlēto mērķproteīnu sekvenču C-galu saīsināšana un pētīta izveidoto mutanto celmu subletālo stresu (oksidatīvā, karstuma un žāvēšanas) izturība, kā arī novērtēta NADPH/NADP un NADH/NAD attiecība. Secināts, ka visi pārbaudītie TOR un PKA mērķproteīni saistīti ar adenīna badināšanas izraisītajām atbildes reakcijām, apstiprinot barības vielu atkarīgo signālceļu asociāciju ar adenīna badināšanas izraisīto stresa izturības fenotipa veidošanos. Novērtēta arī deviņu gēnu transkripcijas izmaiņas adenīna badināšanas laikā, kas apliecina, ka adenīna badināšana izraisa specifisku transkripcijas atbildi. In this work we established connection between TOR and PKA typical target proteins – transcription factors Gln3p, Msn2p, Msn4p, proteinkinase Rim15 and increased stress resistance phenotype, caused by auxotrophic adenine starvation in budding yeast. We truncated C-terminal end of choosen target proteins and investigated several sublethal stress (oxidative, heat and desiccation) resistance, also NADPH/NADP and NADH/NAD ratio of created truncated strains. We concluded that all researched TOR and PKA target proteins are conected with adenine starvation response reactions and confirms association of nutrient-dependant signalling pathways and adenine starvation caused creation of increased stress phenotype. We also estimated transcription rate of nine genes during adenine starvation, which confirms that adenine starvation causes specific transcription response.