Flavonoīdu baikaleīna un luteolīna ietekme uz inducējamās slāpekļa oksīda sintāzes (iNOS) ekspresiju.

Abstract

Baikaleīns un lutolīns ir flavonoīdu grupas dabīgie antioksidanti. Šie preparāti samazina iekaisuma reakciju, modulē imūno atbildi un aizsargā aknas pret toksīniem. Sakarā ar to, ka slāpekļa oksīda (NO) produkcija inducējamās slāpekļa oksīda sintāzes (iNOS) darbības rezultātā ir nozīmīgs iekaisuma reakcijas attīstības posms bija interesanti novērtēt šo preparātu ietekmi uz NO produkciju un iNOS gēna ekspresiju. Mūsu pētījumu grupas iepriekšējie rezultāti iegūtie ar EPR metodes palīdzību liecināja par to, ka baikaleīns un luteolīns samazina NO produkciju žurku aknās, bet šis efekts zūd, kad dzīvniekiem ievada abu preparātu kombināciju. Tāpēc šajā diplomdarbā mēs izpētījām baikaleīna un luteolīna iedarbību uz iNOS gēna ekspresiju izmantojot reversās transkriptāzes - polimerāzes ķēžu reakciju (RT-PCR). Preparātus un to kombināciju ievadījām normālām žurkām un dzīvniekiem, kuriem tika ievadīts lipopolisaharīdu ar nolūku izsaukt eksperimentālu iekaisuma modeli. RNS izdalījām no aknām un veicām RT-PCR reakciju izmantojot iNOS un reportiera gēna praimerus. Mūsu rezultāti liecina par to, ka baikaleīns un luteolīns samazina iNOS ekspresiju normālu žurku aknās un uz LPS fona, bet preparātu kombinācija neietekmē gēna ekspresiju. Parādības mehānisma izpēte ir perspektīvs pētījumu virziens

Baicalein and luteolin are polyphenolic flavonoid antioxidants known to have anti-inflammatory, immuno-modulatory and hepatoprotective effects. Since nitric oxide (NO) produced by inducible nitric oxide synthase (iNOS) is one of the mediators involved in inflammation, the effects of these two naturally occuring flavonoids on NO production were to be evaluated. In the study previously performed in our team by means of ESR method it was shown that baicalein and luteolin decreased NO concentration in several organs of both intact and LPS-treated animals. Combination of the two substances enhanced NO synthesis triggered by LPS. Taking into account obscure nature of the above phenomenon we decided to investigate the role of the iNOS expression modifications produced by these flavonoids and their combination. Baicalein, luteolin or their combination were administered to normal rats or animals with experimental inflammation triggered by LPS administration. RNA was extracted from the liver. Reverse transcriptase polymerase chain reaction was performed using primers for iNOS gene and reporter gene. Our results demonstrate that Baicalein or Luteolin, each individually, appeared to have inhibitory effects on iNOS in concordance with other well-documented studies in literature, nevertheless, combination of both paradoxically seemed to decrease inhibition of iNOS to a desired satisfactory level in an unexpected manner. The mechanism of loss of such inhibitory activity should be investigated in the future