Dažādu vielu efekti uz kalcija līmeni H9C2 šūnās

Abstract

Kalcija joniem ir liela bioloģiskā loma vairāku šūnu procesu regulācijā un aktivācijā. Kalcija līmeni mēra meklējot jaunus kalcija antagonistus, pētot vielu darbības mehānismus, kā arī pētot ilgstošas intracelulārā kalcija līmeņa paaugstināšanās izraisītu citotoksicitāti. Paaugstināts kalcija līmenis izraisa gludās muskulatūras pastiprinātas kontrakcijas, kas noved pie asinsvadu sašaurināšanās un paaugstināta asinsspiediena. Lai normalizētu kardiovaskulāro darbību lieto kalcija antagonistus, piemēram, nifedipīnu un verapamilu. Pētījuma mērķis bija optimizēt kalcija līmeņa mērīšanas metodi, izmantojot zināmus kalcija antagonistus kā references vielas un pētīt gamma aminosviestskābes receptoru ligandu efektus. Kalcija līmeņa mērīšanai žurku mioblastiskas šūnās H9C2 tikai izmantota fluorescentā iezīme Fluo-4 NW un kalcija līmeņa paaugstināšanai karbohols (M holinoreceptoru agonists). Rezultāti liecina, ka references vielas karbohols, nifedipīns un verapamils uzrāda atbilstošu no koncentrācijas atkarīgu efektu, taču gamma aminoskābe un baklofēns neizmaina kalcija līmeni šajā šūnu līnijā.

Calcium ions play a significant role in multi-cellular biological processes. Calcium levels are measured in search of new calcium antagonists, to study mechanisms of action of different substances, as well as studying the long lasting intracellular calcium level-induced cytotoxicity. Increased calcium levels cause contraction of smooth muscles, leading to vasoconstriction and hypertension. Calcium antagonists such as nifedipine and verapamil are used to normalize the functioning of the cardiovascular system. The aim of this work was to optimize the calcium measurement method and to study effects of known calcium antagonists used as the reference substances, as well as to evaluate gamma-aminobutyric acid receptor ligand effects. Fluorescent label Fluo-4 NW kit and the calcium level increasing compound carbochol (M-сholinoreceptor agonist) were used for measuring the level of calcium in rat myoblast cell line H9C2. The results show that the reference substances carbochol, nifedipine and verapamil show adequate concentration-dependent effect, but the gamma-amino acid and baclofen does not alter the levels of calcium in this cell line.